產(chǎn)品分類
- + Merck Millipore
- + Thermo Fisher
- + IKA
- + 顯微鏡
- + 光度計
- + 成像系統(tǒng)
- + MACS Miltenyi
- + 均質(zhì)機(jī)
- + 粒子計數(shù)器
- + 凍干機(jī)
- + 滅菌系統(tǒng)
- + 細(xì)胞
- + 微量移液工作站
- + 振蕩培養(yǎng)箱
- + 生物反應(yīng)器
- + 切片機(jī)
- + 培養(yǎng)箱
- + 蠕動泵
- + 細(xì)胞破（粉）碎機(jī)
- + 轉(zhuǎn)印膜
- + 超濾管
- + Pellicon 超濾系統(tǒng)
- + 超低溫冰箱
- + 清洗機(jī)
- + 干燥機(jī)
- + 洗瓶機(jī)
- + 離心泵
- + 容積泵
- + 各種閥
- + 酶標(biāo)儀
- + 洗衣板
- + 旋光儀
- + 折光儀
- + 行星球磨機(jī)
- + 振動篩
- + 基因?qū)雰x
- + 手套系列
- + 接頭\\連接器
- + 培養(yǎng)板/培養(yǎng)瓶
- + 溫度控制系統(tǒng)
- + 制冷器
- + 存取系統(tǒng)
- + 軋蓋機(jī)
- + 細(xì)胞因子
- + 細(xì)胞分選儀
- + 生物安全柜
- + 滲透壓儀
- + 拉曼光譜儀
- + 電泳系統(tǒng)
- + 純水系統(tǒng)
- + 萃取儀
- + 譜新生物
- + TA 儀器
- + wako
這些注意事項對密理博超濾管的使用很重要
更新時間：2019-06-22 瀏覽次數(shù)：4088
密理博超濾管可用于生物樣品純化、蛋白質(zhì)濃縮、脫鹽和緩沖液更換，垂直結(jié)構(gòu)的膜減少了濃差極化，快速離心并可直接吸取回收樣本，濃縮倍數(shù)高達(dá)80-100倍，是樣本處理的得力助手。密理博超濾管備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用。
密理博超濾管的應(yīng)用：
1、蛋白質(zhì)樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換。
2、樣品中去垢劑的去除；雙向電泳樣品的制備。
3、未結(jié)合標(biāo)志物的去除。
4、尿液的濃縮。
5、核算樣品濃縮及脫鹽。
6、法醫(yī)鑒定分析樣品的預(yù)處理。
7、純化血清多肽做生物標(biāo)志物；抗體的快速濃縮。
密理博超濾管的使用注意事項：
1、新買來的超濾是干燥的，使用前加入超純水，水量*過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷。
2、選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。
3、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer，再濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，zui后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。
4、平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后，有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至zui低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機(jī)，否則離心機(jī)出問題時，無法時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整。在實(shí)際使用中，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer，再濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，zui后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。
6、當(dāng)濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮，直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。